与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相比,Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板,该酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性,但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶在60-65度之间具有很好的反转录活性,可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录,而Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。 |
Bst DNA聚合酶性能比较 |
扩增速度逆转录活性杂质耐受性dUTP识别能力应用Bst大片段***N/A常规链置换反应Bst 2.0**********DNA LAMP SDA反应Bst 3.0*************LAMP和RT-LAMP反应Bst 4.0***************RT-LAMP最佳用酶 |
组分 |
组分名称数量Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (8 U/μl)200 μl/1 ml×210×Isothermo Buffer(Mg2+ free)1 ml×2/20 ml100mM Mg2+1 ml×2/20 ml |
主要特征 |
同时具有较强的延伸能力和逆转录活性 耐热性能极强,对于复杂模板的扩增活性强 强烈的链置换活性,可应用于LAMP检测
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单位定义 |
一个活力单位即在65°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。 |
应用 |
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储存 |
-20℃可保存3年。 |
LAMP实验 |
A:以pEasy质粒为模板,应用Bst 3.0 DNA聚合酶和六条引物进行LAMP实验(65℃,30min),1-6分别为:模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng,M:DNA Marker2000;B:以140ng human RNA为模板,应用Bst 3.0 DNA聚合酶和六条引物进行LAMP实验(65℃,30min),1-3:140ng human RNA为模板,4:不加模板,M:M:DNA Marker2000;
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