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hCMEC/D3-RFP细胞 YB-71641HC-R

ECM;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养

销售价
¥ 3500.00 /株
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hCMEC/D3-RFP细胞 

细胞详情

细胞名称

hCMEC/D3-RFP红色荧光蛋白标记的人脑微血管内皮细胞

货    号

YB-71641HC-R

组织来源

细胞形态

内皮细胞样

生长方式

贴壁生长

描    述

hCMEC/D3细胞系来源于人颞叶微血管,这些微血管是从癫痫手术切除的组织中分离出来的。原代分离物富含脑内皮细胞(CECs)。在第一代中,通过慢病毒载体转导人端粒酶催化亚基(hTERT)和SV40大T抗原,使细胞永生化,然后通过有限稀释克隆选择性分离CEC,克隆具有广泛的脑内皮表型特征。这种脑微血管内皮细胞系代表了一种人类血脑屏障的模型,这种模型很容易生长,并且适合于与中枢神经系统(CNS)相关的病理和药物转运机制的细胞和分子研究。

构建信息

hCMEC/D3-RFP细胞为慢病毒感染hCMEC/D3细胞得到的稳定表达红色荧光蛋白的细胞系。所用载体为HBLV-mcherry-PURO。

培养条件

ECM;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养

换液频率

2-3天

传代周期

3-5天

传代比例

1:3-1:5

冻存液配方

95%完全培养基,5%DMSO

安全性

BSL-2

供应限制

仅供研究之用。


                                                                                                             细胞操作详细步骤

                           --悬浮细胞

1.细胞复苏

1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。

1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。

1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。

1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。

1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到5ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。

2.细胞传代

第一种方法:

2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.

第二种方法:

2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时,将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶,并补充新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.

3.细胞冻存

将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。

4.注意事项

4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。

4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。

4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。

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