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耐热反转录酶——ThermoStable V Reverse Transcriptase
| 耐热反转录酶(ThermoStable V Reverse Transcriptase)是在鼠源病毒反转录酶基础上进行定点突变改良而得。该酶去除了RNase H活性中，从而避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选，使得其热稳定性更强，可耐受65℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应，采用高温反转录可显著打开RNA二级结构，从而提高复杂RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量，从而提高后续检测的灵敏度。 | |
组分 | |
| 组分名称数量ThermoStable V RTase (200 U/μl)50 μl/250 μl5×RT Buffer1 ml/1 ml×10 | |
单位定义 | |
| 以poly(rA)为模板、oligo(dT)为引物，在37°C条件下，10分钟内催化1 nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为一个活性单位。 | |
储存 | |
| -20°C可保存2年。 | |
反应实例 | |
| 以人RNA为模板，应用耐热反转录酶和M-MuLV反转录酶分别在50°C、55°C、60°C和65°C进行反转录反应，反应时间为15min，然后进行PCR扩增获得542bp的片段。 | |
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