成骨细胞矿化结节染色液(茜素红S法)
产品简介:
骨代谢是破骨细胞骨吸收与成骨细胞骨形成的动态平衡过程。成骨细胞负责骨基质的合成、分泌、矿化,是骨重建激活或终止的控制者,它在骨组织的创伤修复、骨组织的生长发育、骨量平衡中起着重要作用,是骨质疏松、骨折等骨病研究的主要焦点。成骨细胞分化是其主导骨形成的前提与基础。在成骨分化过程中,其基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟,而矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志,同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学表现,观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用手段之一。
成骨细胞矿化结节染色常用方法有四环 素法和茜素红S法,应用茜素红溶液对成骨细胞染色,茜素红可与钙离子螯合,产生深红色或紫红色的复合物,可用于鉴定干细胞是否已成功向成骨细胞分化。
自备材料:
1、磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
2、蒸馏水
3、显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、成骨细胞经培养,胰 酶消化,接种培养于6孔板中,每孔有1×105个细胞。
2、细胞连续观察、换液,培养14天。
3、小心吸除培养液,加入足量Ob固定液固定15min。
4、磷酸缓冲盐溶液(1×PBS)洗涤各孔3次,每次3min。
5、加入茜素红S染色液染色30min,可根据染色情况酌情增加或减少染色时间。
6、蒸馏水洗去染色液。肉眼可见细胞呈明显的紫红色。
7、光镜下观察拍照。
注意事项:
1、茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定。一般30min即可。
2、Ob固定液宜挥发,开启后应密封保存;如使用量大可用95%乙醇替代。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。