LBA4404 农杆菌

货        号：    YB79130
规        格：    200ul冻干粉

培  养  基：    LB 琼脂培养基（酵母提取物 5.0 g，蛋白胨 10.0 g，NaCl 10.0 g，琼脂 15.0 g，蒸馏水 1.0 L，pH 7.0。121℃，15min 灭菌。）

培养条件：    温度37℃

气体环境：    好氧

使用方法：

A.活化

1.准备 LB 平板 2 块；

2.无菌环境下，在冻干管中打入 0.5mL 液体培养基，充分溶解冻干粉；

3.将悬液在平板划线培养，2 块平板，18-24h 长出单菌落；

B.感受态制备（供参考）

1.XL10-Gold 大肠杆菌平板上挑取一个单菌落接于 3ml LB 液体培养基的试管中，37 ℃震荡培养过夜。

2.取 1ml 菌液转接到一个含有 50ml LB 液体培养基的锥形瓶中，37 ℃震荡培养 2~3h，A600 应在 0.4~0.5 之间，细胞数务必﹤10 8CFU/ml。

3.用移液枪取 1ml 菌液转移到 1.5 ml 离心管中，冰上放置 10min 。

4.离心 10min，4000r/min。

5.倒尽培养液，用冰冷的 0.1mol/l CaCl2 200 µl 悬浮沉淀，立即放在冰上保温 30min 。

6.低温离心 10min，4000r/min，回收细胞。

7.用冰冷的 0.1mol/l CaCl2 200µl 悬浮细胞。

8.分装细胞，毎 200ul 一份，此细胞为感受态细胞。