GV3101 农杆菌

货        号： YB77903
规        格： 200ul冻干粉

培  养  基： LB 琼脂培养基（酵母提取物 5.0 g ，蛋白胨10.0 g ，NaCl 10.0 g ，琼脂15.0 g ，蒸馏水1.0 L ，pH 7.0 。121℃ ,  15min 灭菌。）

培养条件： 温度37℃

气体环境： 好氧

使用方法

A. 活化

1.准备 LB 平板 2 块；

2.无菌环境下，在冻干管中打入 0.5mL 液体培养基，充分溶解冻干粉；3. 将悬液在平板划线培养，2 块平板，18-24h 长出单菌落；

B. 感受态制备（供参考）

1. XL10-Gold 大肠杆菌平板上挑取一个单菌落接于 3ml LB 液体培养基的试管中，37 ℃震荡培养过夜。

2.取 1ML 菌液转接到一个含有 50ml LB液体培养基的锥形瓶中，37℃震荡培养 2~3h，A600 应在 0.4~0.5 之间，细胞数务必＜108CFU/ml。

3.用移液枪取 1ML 菌液转移到 1.5ML 离心管中，冰上放置 10min。

4.离心 10min，4000r/min。

5.倒尽培养液，用冰冷的 0.1mol/l CaCl2 200µl 悬浮沉淀，立即放在冰上保温 30min。

6.低温离心 10min，4000r/min，回收细胞。

7.用冰冷的 0.1mol/l CaCl2 200µl悬浮细胞。

8. 分装细胞，毎 200ul 一份，此细胞为感受态细胞。