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HCT-15 (人结直肠腺癌细胞) YB-71097HC

HCT-15 细胞(STR鉴定正确)

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HCT-15 (人结直肠腺癌细胞) 

生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

规格:1×10⁶cells/T25培养瓶

2020120908012876917

2020120908014146616

贴壁细胞传代培养:

1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基。

2. 加入1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟(此处为12.5 cm2培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。

3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。

4. 离心200x g/5 min,去除上清后,取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中,并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。

5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。

传代比例:建议 1:6 至 1:9

培养基换液: 每隔 2 至 3 天。

悬浮细胞传代培养:

悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成,具体做法如下:

1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1×106 cells/mL 时,进行细胞传代培养。

2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中,将细胞密度维持在2-3×105cells/mL。

3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度,则进行传代培养。

培养基换液: 每隔2至3天。

注意:培养瓶应使用带滤膜瓶盖以保持培养基与空气和CO2

拆包 & 存储:

1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液

2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养传代

注意:如为冻存管,请收到后立即解冻培养

培养瓶中细胞操作步骤:

对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。

1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。

2. 对于贴壁培养的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8mL左右,随后将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温 培养箱中培养。如果细胞已经长满培养瓶,请立即传代。

3. 对于悬浮培养的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。

冻存细胞操作步骤:

注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。

1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。

2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。

3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。

4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。

5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。

细胞产品的售后政策: 

1、收到细胞24小时内出现细菌、真菌、霉菌污染,72小时检测支原体阳性无条件重发;

2、享有1个月的超长售后免责期;  

3、1个月内,如果第三方鉴定STR错误,可退细胞款项。

4. 细胞运输途中遭遇的问题:丢件、瓶身破损、培养液渗漏;

5. 细胞污染问题,请在收到产品24小时内,给我们提供真实有效实验结果,供核实;

6. 常温发货的细胞经过24小时静置后,有大部分细胞未存活(需提供真实、清晰的细胞状态照片)

7. 干冰冻存管发货的细胞复苏之后,有大部分细胞未存活(需提供真实、清晰的细胞状态照片)


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