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TF-1（人血液白血病细胞）
| 一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | TF-1（人血液白血病细胞） |
细胞别称 | TF1; MFD-1；TF-1；人红白血病细胞 |
商品货号 | YB-71232HC |
种属来源 | 人 |
年龄性别 | 男；35岁 |
组织来源 | 白血病细胞 |
生长特性 | 悬浮生长，生长过程中会有细胞附在培养瓶壁上 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
背景简介 | TF-1细胞系1987年由Kitamura T等建立，源于一名35岁日本男性的肝素化骨髓抽取样本，该患者具有严重的全血细胞减少症。细胞生长完全依赖于IL-3或GM-CSF，对IL-5无反应。多种淋巴因子和细胞因子对该细胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。该细胞不表达血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由该细胞的形态和细胞化学特征及珠蛋白基因的组成性表达，显示该细胞属于红系。氯高铁血红素和δ氨基乙酰丙酸诱导细胞合成血红蛋白，TPA刺激细胞向巨噬细胞样细胞分化。 |
生物安全等级 | 1 |
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
基因表达情况 | |
保藏机构 | ATCC; CRL-2003 DSMZ; ACC-334 ECACC; 93022307 |
培养基 | 90%RPMI-1640+10%FBS+1%双抗+2 ng/ml GM-CSF |
培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液，液氮储存 |
倍增时间 | ~36-72 hours |
STR鉴定位点 | Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：8，9；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14，16；D21S11：30；D2S1338：19；D3S1358：15；D5S818：13；D7S820：12；D8S1179：11，15；FGA：18，19；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：15，17； |
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。